反相硅膠鍵合填料的選型與使用建議：
 

　　根據(jù)目標分子性質選擇
 

　　非極性化合物：優(yōu)先C18填料，利用強疏水作用實現(xiàn)高效保留。
 

　　極性化合物：選擇短鏈填料(如C4、C8)或特殊官能團填料(如CN、Diol)，或通過調整流動相極性(如增加水相比例)優(yōu)化分離。
 

　　生物大分子：關注填料孔徑(需大于分子直徑)和pH耐受性，避免強疏水性導致變性。
 

　　考慮方法開發(fā)需求
 

　　高通量篩選：選擇機械穩(wěn)定性高、壽命長的填料(如高純硅膠基質)，減少更換頻率。
 

　　復雜樣品分析：寬pH填料支持**條件下的分離與清洗，延長柱壽命。
 

　　梯度洗脫：低比表面積填料可迅速達到平衡，適合梯度洗脫；高比表面積填料提高上樣量，適合制備色譜。
 

　　操作條件優(yōu)化
 

　　流動相選擇：甲醇-水體系粘度較低，適合常規(guī)分離；乙腈-水體系洗脫強度更高，可縮短分析時間。
 

　　柱溫控制：較高柱溫(35-50℃)降低柱壓并加快傳質速率，提高柱效；低溫(0-15℃)可能延長保留時間，需根據(jù)需求調整。
 

　　封尾處理必要性：對堿性化合物或極性小分子，優(yōu)先選擇封尾填料；對極性大分子，可考慮未封尾填料以增強保留。